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扫描电子显微镜(SEM)

扫描电子显微镜SEM实验服务:脱水干燥+喷金+扫描电镜观察(提供3个视野,每视野3张图片),询价。


扫描电子显微镜SEM,是细胞生物学研究工具,主要是利用二次电子信号成像来观察样品的表面形态,通过电子束与样品的相互作用产生各种效应,主要是样品的二次电子发射。二次电子能够产生样品表面放大的形貌像,这个像是在样品被扫描时按时序建立起来的,即使用逐点成像的方法获得放大像。获得图像为立体形象,反映标本的表面结构。

测试项目

1、材料表面形貌分析,微区形貌观察

2、各种材料形状、大小、表面、断面、粒径分布分析

3、各种薄膜样品表面形貌观察、薄膜粗糙度及膜厚分析

 

【扫描电镜的制样要求】

1、【取材】:要求动作轻、迅速、准确,为了保持生活状态,应在固定前清洗掉表面杂质,即,迅速将标本放在PBS缓冲液中冲洗,也可超声波器中超10s-30s,使样品所带的污物除去(如:气管内壁上的粘液、植物叶上的灰尘等)。

2、【固定(前固定)】:经过清洗的样品迅速投入2-4%戊二醛囤定液中,间歇振荡且室温固定约2-4小时即可。

样品固定的目的:使样品细胞的微细结构完整真实地保存下来。如果样品没有很好地固定,那么样品在脱水时可能变形,破坏了样品的生活状态,也就是说,固定不好的材料,电镜下不能反映真实结构,所以这一步很重要。

3、【冲洗】:0.1M PH7.2 PBS缓冲液洗:30分钟中间换3-4次,因戊二醛与锇酸反应生成细微的沉淀,所以在后固定之前,用0.1M PBS缓冲液洗去多余的戊二醛之后,样品才可能进入锇酸固定液。

4、【后固定】:1%四氧化锇后固定1-2小时。

5、【冲洗】:重蒸水冲洗30分钟中间换3-4次,因四氧化锇与乙醇反应,所以在脱水前充分洗去残留的四氧化锇,样品才能进行脱水。

6、【脱水】:脱水剂为乙醇,室温进行为了减少人工损伤,需要梯度脱水:30%50%70%80%90%95%100%,每级15-20分钟,如果是动物样品,脱水时间可5-10分钟,脱水要充分完全地进行直到除尽样品中的水份为止,最后100%乙醇要重复2-3次,保证样品绝对无水。

7、【置换】:醋酸异戊酯30分钟或者过夜,样品脱水后,放入醋酸异戊酯中。样品在脱水时,样品中的水份被乙醇脱水剂替代,而乙醇挥发较快易自然干燥,固选用挥发较慢的乙酸异戊酯,既能与CO2溶合,又能与乙醇溶合,作中间媒介液置换。